什么是银染：

银染是一种特殊而强大的染色技术，可用于检测和鉴定凝胶中的蛋白质。这是因为银结合在氨基的化学末端或侧链上，即羧基和巯基。它已经被用于从聚丙烯酰胺凝胶电泳中分离蛋白质。银染是一种高度灵敏的方法，对蛋白质具有特异性和选择性。它产生的图像背景更少，质谱干扰更少。银染的一般程序包括银的固定、致敏作用、银的浸渍和图像的形成。一些被改良的银染方法能在一小时内完成，另一些需要24小时才能完成。末端染色可以稳定保持几周。

图1：银染结果（图片来源于Polysciences, Inc.）

银染的原理：

银染有两种主要方法，差异主要在银浸渗阶段。

碱法：

该方法主要是利用铵和氢氧化钠组成的碱性空间中的硝酸银的二胺络合物。

蛋白质模式是在稀释的酸性的甲醛溶液中形成的。

酸法：

该方法采用水中的硝酸银溶液进行凝胶浸渍，并在氨和氢氧化钠的碱性环境下的甲醛溶液中建立蛋白质模式。银染是一种简单的方法，将靠近蛋白质分子的起始位点的银选择性还原为不溶的金属银。

银染色的各个阶段是：

蛋白质的固定和干扰成分的去除。

用加速蛋白质对银和/或银还原（敏感和洗涤）的元素进行凝胶处理。

用纯硝酸银或氨化银浸渍银

凝胶冲洗和获得银金属图像。

所产生的图像阴影取决于附着在银质上的蛋白质的数量。

银染的蛋白显示深棕色或黑色，这取决于染色银的颜色强度。

颜色的变化是由于不同大小的银颗粒的散射和衍射。

银染所需的试剂：

1. 3%丙烯酰胺溶液：将2.0 ml 0.8 M Tris-HCl（pH 8.6）、0.75 ml 38.9%（w/v）丙烯酰胺和1.1%（w/v）双丙烯酰胺加入7.25 ml水中和8 mg过硫酸铵混合制备。

2. 20%丙烯酰胺溶液：将2.0 ml 0.8 M Tris-HCl（pH 8.6）、5.0 ml 38.9%丙烯酰胺和1.1%双丙烯酰胺以及8 mg过硫酸铵加入3 ml水中。

3. 用40%乙醇、10%醋酸、50%水混合配制固定液。

4. 由20%乙醇、5%乙酸、75%水、4 mg二硫苏糖醇混合配制蛋白质处理溶液。

5. 0.5%重铬酸盐