H&E染色概述：

苏木精和伊红染色技术的功能是识别不同类型的组织及其形态变化，特别是在癌症诊断中。苏木精具有深蓝紫色，并通过复杂的、不完全了解的反应对核酸进行染色。伊红是粉红色的，对蛋白质进行非特异性染色。在典型的组织中，细胞核被染成蓝色，而细胞质和细胞外基质具有不同程度的粉红色染色。

苏木精和伊红染色剂是组织学和组织病理学中使用的主要诊断染色剂，包括应用于细针抽吸活检、石蜡固定包埋组织。苏木精用于通过观察染料颜色的深度和样品悬浮在染料中的时间来证明细胞的细胞核及其含量。

苏木精和伊红都是染料，自然地，染料对组织具有高亲和力，具体取决于染料的酸度和/或碱度。

H&E染色的原理：

苏木精是从苏木精树中提取的，在氧化时，苏木精由苏木精（苏木精和伊红染色技术中使用的染料）产生苏木精。添加媒染剂可使血红素与组织的阴离子元素结合。不含伊红的苏木精在使用比色底物（如碱性磷酸酶或过氧化物酶）的免疫组织化学和杂交方案中起到复染作用。

伊红染料是酸性染料，因此它是负电荷（嗜酸性粒细胞）。因此，它会染色细胞的基本结构（嗜酸乳杆菌），使它们呈红色或粉红色，例如，细胞质带正电，因此它会吸收伊红染料，并呈现粉红色。

苏木精染料是碱性染料，因此带正电荷。因此，它会染色组织和细胞结构的酸性结构（嗜碱性），紫蓝色。苏木精本身不是碱性的。在使用之前，它必须与媒染剂（铝盐）结合，以加强其正电荷，以有效地与组织成分结合。媒染剂也定义了染色剂的颜色，它将与组织结合，然后苏木精将与媒染剂结合，形成组织-媒染剂-苏木精复合物链接。这会将细胞核和染色质体染成紫色。

H&E染色可分为三种类型：渐进性，改良渐进性和回归性。进行渐进染色，无需区分添加苏木精后去除任何多余的染料。这会导致带电载玻片中发生背景染色。它主要用于染色粘蛋白。虽然改良的渐进和回归，使用区分器去除过多的染料。它用于显示细胞核内容。

H&E染色所需试剂：

蒸馏水、明矾苏木精、酸性醇、伊红染料

H&E染色步骤：

 该过程简化为各种过程：脱蜡，脱水，苏木精，分化，发蓝，伊红，脱水，清除，盖玻片。

1. 用蒸馏水清洗切片。

2. 然后用明矾苏木精（Mayer's）染色细胞核以固定组织，约5分钟。

3. 用平稳流动的自来水冲洗污渍

4. 使用鉴别器，0.3%酸性酒精，并注意终点，即正确的终点是在蓝色之后，背景变为无色。

5. 用平稳流动的自来水冲洗污渍。

6. 用伊红浸入涂片2分钟，由于伊红极易溶于水，因此请使用足够的定量。过度染色的伊红可以用流动的自来水去除或冲洗掉。

7. 将涂抹物脱水，清除并使用干净的盖玻片进行封盖。

结果和解释：

细胞核呈蓝色，而细胞质和细胞外基质具有不同程度的粉红色染色。固定良好的细胞显示出相当大的核内细节。细胞核显示异染色质凝聚的不同细胞类型和癌症特异性模式（苏木精染色），这在诊断上非常重要。核仁染色与伊红。如果存在丰富的多核糖体，细胞质将具有明显的蓝色偏斜。

图1：从肺气肿患者身上取下的肺组织（图片来源：维基百科）

H&E染色的应用：

它广泛用于组织病理学、免疫化学和免疫病理学，以分析和展示组织和细胞的形态。

H&E染色的优势：

该方法执行迅速，价格便宜且可以更改。

H&E染色的不足：

苏木精和伊红效率低下，因为无法接收物质的所有特征，必须使用特殊染色剂。

参考信息来源：

1. Hematoxylin and eosin staining of tissue and cell sections. Fischer AH, Jacobson KA, Rose J, Zeller R.

2. H&E Staining Overview: A Guide to Best Practices Cindy Sampias, Geoffrey Rolls

3. The Science and Application of Hematoxylin and Eosin Staining Skip Brown

4.https://www.histology./what-ishistology/H_and_E.php

5. https://www./_protocols/special_stains/h&e_ellis.htm

6. https://www./spg464557_mordants.aspx

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